雪落樱遗传多样性研究毕业论文_林学毕业论文

雪落樱遗传多样性研究毕业论文

2021-04-27更新

摘 要

雪落樱(Cerasus xueluoensis)为蔷薇科(Rosaceae)樱属(Cerasus)植物,是一种高山矮生樱花,其花色淡雅,树形优美,具有极大的开发利用价值。本文选择江西庐山,湖南大围山,湖北利川,湖北建始,湖北雪落寨,浙江大仰山共6个雪落樱野生居群中的180份材料进行基因组DNA提取,筛选出了7对合适于雪落樱研究的SSR引物并优化了雪落樱的SSR-PCR程序。主要研究结果如下:(1)雪落樱叶片含有多糖物质较难与DNA分离,采用CTAB裂解——硅珠吸附法可较好的提取DNA。(2)AM287842、MA007a、MA016b、CPSCT044、BPPCT040、DY647422、UDPGA98-406这7对引物适用于雪落樱的PCR扩增反应,可得到清晰且多态性较好的条带。(3)SSR-PCR反应体系的建立可应用于雪落樱遗传多样性的研究。

关键词:雪落樱;SSR;引物筛选;PCR-SSR扩增程序优化;DNA提取优化

primer selection in SSR of Cerasus xueluoensis

ABSTRACT

Cerasus xueluoensis, belonging to Cerasus (Rosaceae), is a new resource of dwarf type. Its elegant color flower and beautiful shape trunk have great development value. This paper chooses 6 wild populations and 180 samples to optimize the SSR amplification procedure of Cerasus xueluoensis. Meanwhile This paper screened 7 SSR markers, which is suitable for diversity studies of Cerasus xueluoensis from 17 related primers. The main results are as follows:

  1. Cerasus xueluoensis containing polysaccharides and other substances is difficult to separate DNA. This problem can be solved by CTAB cracking – silica beads adsorption method.

2.These primers(TAM287842, MA007a, MA016b, CPSCT044, BPPCT040, DY647422 and UDPGA98-406 ) apply to PCR amplification reaction of Cerasus xueluoensis.

3.Establishing the SSR reaction system of Cerasus xueluoensis can be used in Study on genetic diversity of Cerasus xueluoensis.

Key words:Cerasus xueluoensis;SSR;primer selection; optimization of SSR amplification procedure; optimization of DNA extraction

目 录

1 前言…………………………………………………………………………………………………………1

2 文献综述……………………………………………………………………………………………………2

2.1 樱属分类学研究进展………………………………………………………………………2

2.2 樱属形态学研究进展………………………………………………………………………2

2.3 樱属细胞学研究进展………………………………………………………………………3

2.4 樱属生态学研究进展………………………………………………………………………3

2.5 樱属分子生物学研究进展…………………………………………………………………4

2.5.1 RELP分析………………………………………………………………………4

2.5.2 RAPD分析………………………………………………………………………4

2.5.3 SSR分析…………………………………………………………………………4

2.5.4 AFLP分析………………………………………………………………………4

2.6 研究目的与意义……………………………………………………………………………5

3 材料与方法…………………………………………………………………………………………………6

3.1 材料采集……………………………………………………………………………………………6

3.2 试验方法……………………………………………………………………………………………6

3.2.1 总DNA的提取与纯化…………………………………………………………6

3.2.2 SSR-PCR扩增反应……………………………………………………………7

3.2.3 电泳分析……………………………………………………………………………8

4 结果与分析…………………………………………………………………………………………………10

4.1 雪落樱分子材料野外采集保存的最佳方法…………………………………………10

4.2 雪落樱DNA提取方法优化…………………………………………………………………10

4.3 雪落樱SSR引物筛选结果……………………………………………………………………11

4.4 雪落樱SSR-PCR反应体系的优化…………………………………………………………12

结论 …………………………………………………………………………………………………14

致谢 ………………………………………………………………………………………………15

参考文献 …………………………………………………………………………………………16

附录 ………………………………………………………………………………………………18

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