摘 要

樱属(Cerasus)植物隶属于蔷薇科(Rosaceae)，李亚科(Prunoidea)，是世界著名的园林观赏植物，我国拥有丰富的樱属植物资源。该属植物具有高度的变异且存在大量杂交起源的多倍体，属下分类和种的界定争议较大。本实验以8种(品种)樱属植物为研究对象，运用流式细胞术，将内标法与外标法相结合，确定了大叶早樱(C. subhirtella)、红山樱(C.jamasakura)、红枝垂(C.subhirtella ‘Plendula Rosea’)、吉祥寺(C.yedoensis ‘Kchijouji’)、江户彼岸(C.spachiana var.spachina)、墨染(C. serrulata var. lannesiana 'subfusca')、山樱花(C.serrulata)、阳光樱(C.campanulata‘Youkou’)的基因组大小分别为：497.13MB、228.22MB、528.96MB、490.81MB、505.24MB、490.61MB、272.13MB、252.79MB，并根据基因组大小分析了细胞倍性，发现红山樱与阳光樱为二倍体、大叶早樱与江户彼岸为三倍体、红枝垂、吉祥寺与墨染为四倍体。同时探索了适合樱属的流式细胞术实验材料及实验流程，为该属的起源及演化提供了细胞学证据，并且为该属植物的流式细胞术实验方法优化提供了参考。

关键词：樱属；流式细胞术；倍性；基因组大小

The Study of cell ploidy on Different Species in Cerasus

Abstract

The genus Cerasus of the Rosaceae–Prunoideae was a worldwide famous ornamental flowering plant and has rich resources in China.The genus has high variability and a lot of polyploids hybrid origin. The classification and species definition are controversial. Eight species of cerasus were taken as the experimentalin this paper. Ploidy and Genome Size were analyzed by using flow cytometry.In this paper,internal standard method was cambined with external standard method.In the end,we can identify the genome size of C. subhirtella, C.jamasakura, C.subhirtella ‘Plendula Rosea’, C.yedoensis ‘Kchijouji’, C.spachiana var.spachina, C. serrulata var. lannesiana 'subfusca',C. serrulata, C.campanulata‘Youkou’ are: 497.13MB、228.22MB、528.96MB、490.81MB、505.24MB、490.61MB、272.13MB、252.79MB.With the genome size,we can identify that C.jamasakura and C.campanulata‘Youkou’ are diploid; C. subhirtella and C.spachiana var.spachina are Triploid; C.subhirtella ‘Plendula Rosea’, C.yedoensis ‘Kchijouji’, C. serrulata var. lannesiana 'subfusca' are Tetraploid.The paper also explores the experiment materials and processes which are suitable for Cerasus.This paper will provide reference for the origin and evolution.The paper also provides the reference for the optimization of flow cytometry for the genus experiment method.

Keywords: Cerasus; Flow cytometry; Ploidy; Genome size

目 录

1 文献综述……………………………………………………………………………………1

1.1 樱花品种资源概况……………………………………………………………………1

1.2 植物倍性研究概况……………………………………………………………………2

1.2.1 利用核型研究植物的倍性……………………………………………………..2

1.2.1.1 核型分析的概况……………………………………………………….2

1.2.1.2 核型分析在木本植物中的应用……………………………………….3

1.2.2 利用流式细胞术鉴定倍性研究………………………………………………..3

1.2.2.1 流式细胞术的概况…………………………………………………….4

1.2.2.2 利用流式细胞术测定植物的倍性…………………………………….4

1.3 研究目的及意义……………………………………………………………………….5

2 樱花不同品种的倍性研究……………………………………………………………….….6

2.1 材料与方法……………………………………………………………………………..6

2.1.1 实验材料…………………………………………………………………………6

2.1.2 实验方法………………………………………………………………………….8

2.1.2.1 叶片的前期处理…………………………………………………………8

2.1.2.2 细胞核悬浮液的制备……………………………………………………8

2.2 结果分析…………………………………………………………………………………9

2.3 讨论………………………………………………………………………………………11

3 樱花不同品种的基因组大小测定研究……………………………………………………..13

3.1 材料与方法………………………………………………………………………………13

3.1.1 实验材料、试剂及仪器………………………………………………………….13

3.1.2 实验方法………………………………………………………………………...13

3.1.2.1 裂解液的制备…………………………………………………………..13

3.1.2.2 细胞核悬浮液制备…………………………………………………..…13

3.1.2.3 流式细胞仪测定………………………………………………………..13

3.2 结果分析………………………………………………………………………………..13

3.3 讨论……………………………………………………………………………………..16

4 结论………………………………………………………………………………………….17

4.1 结论与建议…………………………………………………………………………..…17

4.2 展望……………………………………………………………………………..……….17

致谢…………………………………………………………………………………………….19

参考文献……………………………………………………………………………………… 20

1 文献综述

1.1 樱花品种资源概况

樱花是著名的木本观赏花卉，隶属于蔷薇科(Rosaceae)李亚科(Prunusoidea)樱属(Cerasus )，在世界各地广泛栽培。其中日本的樱花研究与产业发展均遥遥领先。

根据花、叶、花序、树型等形态依据可将樱花分不同的品种。目前，世界樱属植物统计有150种，中国樱属植物超过50个种或变种，至今已发表中国樱属植物野生种（变种）双学名293个，已处理272个，21个学名未作处理，需进一步研究^[1]。