摘 要

本文利用南林895杨组培苗茎段做外植体诱导愈伤组织，以继代2次愈伤组织为实验材料，研究生长延缓剂多效唑（PP333）对愈伤组织保存状况的影响，具体结果表明：低浓度的PP333有利于愈伤组织的保存，而高浓度的PP333则会对愈伤组织产生毒害作用。在培养基（3/4MS 2,4-D_2mg/L KT_0.2mg/L 蔗糖_10g/L 琼脂_7.5g/L, pH5.8）中添加2～4的PP333培养，50d后，愈伤组织日生长量约是对照组日生长量的一半，短细胞比例为45%左右，经过恢复生长后，其成活率为50%左右，高于其他处理组和对照组，长势也优于其他处理组。较高浓度的PP333（6~10mg/L）对愈伤组织毒害作用较大，愈伤组织不易恢复生长。

键词：南林895杨；多效唑；愈伤组织；保存

Effect of Paclobutrazol on Populus×euramericana ‘NanLin 895’ callus preservation

Abstract

The Populus×euramericana ‘NanLin 895’ in vitro seedling stem segments as explants of callus induction, subculture twice callus as experimental materials, to study the growth of retarding agent Paclobutrazol effects on callus preservation condition and specific results showed that: low concentration of PP333 is conducive to the preservation of the callus, and the high concentration of PP333 will produce toxic effects on callus. Add 2～4PP333 in the culture medium（3/4MS 2,4-D_2mg/L KT_0.2mg/L sucrose_10g/L agar_7.5g/L, pH5.8） . After 50 days, the daily growth of callus was about half of the daily growth of the control group. The proportion of short cells is about 45%, after recovery growth, its survival rate is about 50%, higher than other treatment group and control group, growth was also superior to other treatment groups. The higher concentration of PP333（6~10mg/L） had a great effect on the toxicity of callus. Callus is not easy to restore growth.

Key words:Populus×euramericana ‘NanLin 895’：PP333：Callus：preservation

目 录

1.引言 1

2.试验材料与方法 1

2.1试验材料 1

2.2试验方法 1

2.2.1愈伤组织保存最佳多效唑（PP333）浓度的筛选 1

2.2.2愈伤组织恢复生长 2

2.2.3不同浓度多效唑保存条件下愈伤组织生理生化指标测定 2

2.2.4统计分析 5

3.结果与分析 5

3.1愈伤组织生长的状况 5

3.2不同浓度多效唑处理条件下愈伤组织生理生化指标的动态变化 8

4.讨论 9

4.1多效唑对愈伤组织生长状况的影响 9

4.2愈伤组织短细胞比例对多效唑的响应 9

4.3多效唑处理与愈伤组织成活率的相关性 10

4.4愈伤组织生理生化指标对多效唑浓度的响应 10

结论 14

致谢 15

参考文献 16

目录 17

1引言

多效唑(PP333)是一种植物生长延缓剂，能抑制多种作物生长。在延缓离体植物的生长过程中，常采用在植物的培养基中加入不同浓度的多效唑，使离体植株生长降至最小限度但不死亡，从而达到延长继代培养时间的目的（贾洪涛等，2003）。这种离体保存方法的最大优点是使保存材料维持不断生长，又能减少继代周期。此方法已在多种离体无菌苗的种质保存得到应用并取得了较好保存效果，例如多效唑对甘薯（Ipomoea batatas）试管苗种质资源保存（张海燕，2008）、多效唑对草莓（Fragaria ananassa）种质离体保存的影响（赵密珍等，2003）等，但多效唑在愈伤组织的种质保存中应用的资料却很少报道。本试验将不同浓度的多效唑加入到培养基中，拟探究多效唑对南林895杨愈伤组织种质保存的作用效果。

2试验材料与方法

2.1试验材料

采用南林895杨无菌苗茎作为外植体，诱导愈伤组织，继代培养2次后，选择长势较好的愈伤组织，进行愈伤组织低温保存条件的比较研究。

2.2试验方法

2.2.1愈伤组织保存最佳多效唑（PP333）浓度的筛选

将继代培养2次后的南林895杨愈伤组织，切成大小约为3mm×3mm组织块，接种到添加有不同浓度PP333的继代培养基上，每个接种瓶内接种3～5块，每一块愈伤组织重约0.05g左右，试验设计如表1所示：

表1愈伤组织保存最佳多效唑（PP333）浓度的筛选

Table 1 Selection of the best paclobutrazol concentration in callus preservation

培养50d后，比较不同浓度PP333条件下愈伤组织的生长形态、日生长量、褐化率及短细胞比例。