摘 要

［目的］柳树黑斑病在垂柳中普遍发生，病斑与病症的描述与杨树黑斑病类似。但是通过初步研究，柳树致病真菌不同于杨树，它们属于不同的分类单元。我们对病原真菌进行分离鉴定，了解发病过程，明确其侵染的寄主范围和致病能力，为今后柳树在园林应用中提供理论依据。［方法］通过形态学观察、致病性测定、单孢分离和ITS序列分析对病菌进行了鉴定。［结果］确定柳树黑斑病的典型症状，病原菌分离证明II菌是致病菌；形态学观察和ITS序列分析表明，病原菌为痂囊腔菌(Elsinoe)。［结论］病原菌对不同柳树品种的侵染能力存在差异，有的病原菌只侵染一种柳树，有的病原菌侵染多种。叶片的幼嫩程度影响寄主范围，幼嫩叶感病，老叶不一定感病。引起柳树黑斑病的病原菌为痂囊腔菌(Elsinoe)，此前针对Elsinoe 引起柳树病害的研究较少。

关键字：柳树；黑斑病；分离鉴定；痂囊腔菌；致病性

Analysis of pathogenic fungi Alternaria willow isolation and host range

ABSTRACT

[Objective] Willow willow generally occurs in the black spot, spot and conditions described with similar poplar black spot. However, in the preliminary study, the pathogenic fungi were different from those of poplar. Isolation and identification of pathogenic fungi, understanding of the pathogenesis, the scope of the infection and the pathogenicity of the disease, in order to provide a theoretical basis for the future application of willow in the garden. [method] The pathogen was identified by morphological observation, pathogenicity, single-spore separation and ITS sequence analysis. [result] To determine the typical symptoms of willow of black spot pathogen that is pathogenic bacteria II; Morphological observation and ITS sequence analysis showed that the pathogen was Elsinoe. [Conclusion] The infection ability of pathogens to different willow varieties was different, some pathogens only infect one kind of willow, and some pathogens infect many kinds. The degree of the young leaves affected the host range, the young leaves were susceptible to disease, and the old leaves were not susceptible to disease. Pathogens causing black spot for willow scab capsule cavity bacteria (Elsinoe), prior to the Elsinoe caused less willow disease.

Key words：Willow; black spot; isolation and identification; Elsinoe；Pathogenicity

目 录

1 前言 1

1.1 柳树的形态特征 1

1.2 柳树的主要特性 1

1.2.1 观赏特性 1

1.2.2 速生特性 1

1.2.3 适应性强特性 2

1.2.4 经济特性 2

1.3 国内外研究进展 2

1.4 柳树黑斑病 3

1.4.1 发生与危害 3

1.4.2 发病症状 3

1.4.3 病原菌 4

1.5 植物病原菌的鉴定方法 4

1.6 本研究的目的意义 4

2材料与方法 4

2.1 试验材料 4

2.1.1 病样采集 4

2.1.2 仪器与用品 5

2.2病原菌分离与纯化 5

2.3致病性鉴定 5

2.4单孢分离 5

2.5形态学测定 5

2.6分子生物学鉴定 6

2.6.1 DNA提取 6

2.6.2 ITS 区 PCR 扩增 6

2.6.3纯化 7

2.6.4切胶回收 7

2.7数据分析 8

3结果与分析 8

3.1病害症状 8

3.2病原菌的致病性 8

3.3发病过程 8

3.4形态学特征 9

3.5分子鉴定 11

3.6寄主范围的分析 12

4结论与讨论 13

5展望 14

致 谢 15

参考文献： 16

1 前言

• 1. 柳树的形态特征

钻天柳属(Chosenia)和柳属(Salix)的通称是杨柳科，而柳树即是其中一种。柳树品种丰富,分布于世界各地，不包括澳洲和南极洲,其余洲都有其天然分布，初步估计有520多种。国内的柳树有257种，除此之外还有122个变种,总的来说，有190多种属于灌木^[1]。不管在国内还是国外，柳树都有其重要作用。柳树在我国占有较高地位，是重要的阔叶树种,既有低至15～30cm的灌木，也有高达20m以上的乔木，是用材林、风景林、防护林及水土保持林的重要构成树种,具有较高的生态效益和经济价值。在欧洲,柳树是重要的能源树种。

• 1. 柳树的主要特性

1.2.1 观赏特性

柳树是重要的景观树种，主要包括垂柳、簸箕柳、旱柳、杞柳、爆竹柳等品种，每一种都具有各自的观赏特性。值得一提的是美国竹柳，乔木，具有生长速度快、萌发力强、顶端优势强、分枝早和皮色丰富的特点。相比较其他柳树品种，属于大叶型，叶披针形，单叶互生，叶的长、宽都超乎一般柳属植物。叶片呈三色系，正面绿色，背面灰白色，叶柄微红色。树皮幼嫩时呈绿色，光滑，老时黄褐色，形成鲜明的对比。枝干冬季呈浅红色，具有一种色彩美，冬季可作为观枝干树种。树冠塔形，分枝匀称、干形通直，树姿曼妙。竹柳是新的柳树杂交品种，用途遍及各个领域，主要涉及到工业原料、林业径材栽培、园林绿化和农田防护方面。垂柳，落叶乔木，树形高大，是常见的柳树品种，具有分布范围广、萌芽力强、根系发达、生长速度快、观赏价值高、经济价值高和成本低的特点，深受各地人们的喜欢。小枝细长下垂，最适宜配置于水边，如桥头、河流、湖泊等水系沿岸处。间植桃树，一红一绿的景物相互衬托，形成柳绿桃红之景，是江南园林春色常见的配置方式。也可作行道树、庭荫树和公路树，亦用于工厂周围净化空气，还是巩固堤坝、保护河岸的重要树种。

1.2.2 速生特性